Назначение: набор BÜHLMANN CAST  ELISA предназначен для количественного определения сульфидолейкотриенов C4, D4, E4 при стимуляции изолированных лейкоцитов специфическими аллергенами в образцах человеческой крови, стабилизированной EDTA, иммуноферментным методом.

РЕАГЕНТЫ, ПОСТАВЛЯЕМЫЕ ОТДЕЛЬНО ПО ЗАПРОСУ:

Аллергены лиофилизированные или готовые для разведения в концентрированном виде (смотрите список аллергенов).

Контроль стимуляции анти-IgE рецептор (кат.№ B-CCR-STCON).

Контроль стимуляции fMLP (кат.№ B-CCR-FMLP).

Длина волны измерения: 405 нм.

Диапазон измерения: 19-3200 пг/мл.

Чувствительность: 19 пг/мл.

Приложения теста: jсновные виды аллергии, которые мы определяем приоритетно – это те, которые связаны с угрозой самой жизни пациента - с анафилактическими реакциями, частота которых оценивается в Европе как 8-10 на 100 тысяч населения. В основном причиной анафилаксии являются укусы перепончатокрылых насекомых (60% случаев), лекарства (20%) и пищевые аллергены (10%). На сегодняшний день аллергологи располагают следующими средствами специфической диагностики аллергической реакции немедленного типа / IgE-опосредованной реакции (анафилаксия, риноконъюнктивиты, астма, крапивница/отек Квинке): кожные тесты, определение специфических IgE-антител (sIgE) и провокационные тесты in vivo для подтверждения. Несмотря на большой прогресс в диагностике аллергических состояний, аллергологи часто сталкиваются с проблемой подтверждения неясных результатов кожных тестов и определения sIgE независимым методом. К тому же, некоторые виды аллергии (на лекарственные средства, пищевые добавки) очень плохо выявляются кожными тестами или серологически (sIgE), для них в настоящее время достоверны только дорогостоящие и опасные провокационные тесты. Именно для таких видов аллергии предназначены тесты для оценки активации базофилов специфическими аллергенами.

АКТИВАЦИЯ БАЗОФИЛОВ СПЕЦИФИЧЕСКИМИ АЛЛЕРГЕНАМИ

Базофилы и мастоциты играют центральную роль в аллергических реакциях немедленного типа. Эти реакции приводят также к синтезу и секреции лейкотриенов, цитокинов, медиаторов воспаления, вызывающих симптомы аллергии. Лейкотриены являются мощными бронхоконстрикторами, они вовлечены в повышение проницаемости сосудов, влияют на активацию эозинофилов и гипертрофию гладкой мускулатуры бронхов. Лейкотриены синтезируются также и в случае псевдоаллергической реакции, т.е. без участия sIgE. В патогенезе этой реакции выделяют только две стадии – патохимическую и патофизиологическую. В псевдоаллергических реакциях происходит активация базофилов и неспецифическое высвобождение медиаторов.

Некоторые клеточные аллергические тесты уже доступны много лет, подобно прямой микроскопической оценке дегрануляции базофилов по окраске щелочными красителями или определение концентрации освобожденного гистамина из реактивных базофилов после стимуляции. Эти методы имеют ряд известных ограничений, препятствующих их широкому распространению (воспроизводимость, специфичность, чувствительность). Компанией Buhlmann Laboratories (Швейцария) был разработан тест стимуляции базофилов in vitro – метод CAST.

ОПИСАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ

Технология CAST (Cellular Antigen Stimulation Test, тест антигенной стимуляции клеток) основана на определении маркеров активации базофилов под действием аллергенов in vitro либо методом проточной цитометрии (базофилы, экспрессирующие CD63), либо на определении сульфидолейкотриенов (LTC4, LTD4, LTE4), секретируемых базофилами. Его также называют провокационным тестом in vitro. Метод патентован, авторы - проф. De Weck и д-р Sainte-Laudy. Благодаря синтезу сульфидолейкотриенов (sLT) de novo анализ CAST  обладает высочайшей специфичностью по сравнению с классическим тестом высвобождения гистамина, особенно при лекарственной гиперчувствительности.

В качестве позитивного контроля для каждого образца используют моноклональные антитела к высоко аффинному рецептору для IgE (FcεRI), обеспечивающие имитацию связывания IgE-антител с рецептором на мембране базофилов, что повышает специфичность метода.

Чтобы получить надежные и воспроизводимые результаты, очень важно правильно подобрать аллергены для реакции и их дозировку, т.к. некоторые из них способны неспецифически взаимодействовать с базофилами in vitro (лекарства, пищевые добавки, др.). Большой спектр аллергенов, предлагаемых компанией Buhlmann Laboratories. тщательно подобран и протестирован для этих целей.

ОБЛАСТИ ПРИМЕНЕНИЯ МЕТОДОВ CAST

- для диагностики и подтверждения IgE-зависимой аллергии и псевдоаллергических реакций, особенно лекарственной непереносимости, в случаях противоречивых или отрицательных результатов кожных тестов и анализа sIgE,

- для диагностики аллергии к ядам насекомых, для принятия решения о проведении специфической иммунотерапии (СИТ) аллергенами насекомых и контроле СИТ (уровень лейкотриенов снижается после успешного лечения),

– это единственный метод, кроме провокационного теста, позволяющий идентифицировать причинно-значимый аллерген при отрицательных результатах кожных тестов и анализа sIgE (10% пациентов),

- для определения аутоанти-IgE-антител и антител к рецептору IgE, обнаруживаемых в некоторых случаях хронической крапивницы,

- для подбора адекватной схемы лечения,
- а также для составления гипоаллергенной диеты.