Назначение: набор ELISA Kit for Tight Junction Protein 1 (TJP1) предназначен для количественного определения белка плотных контактов 1 (TJP1, белок Zonula occludens 1 (ZO-1)) в образцах тканевых гомогенатов, клеточных лизатов и других биологических жидкостей методом иммуноферментного анализа.
Диапазон измерения: 0.054-10.0 нг/мл.
Чувствительность: 0.054 нг/мл.
Приложения теста: белок zonnula occludens 1 (ZO-1), первый идентифицированный белок плотных контактов (TJ), является одним из наиболее изученных компонентов пластинки TJ. Он имеет типичные функциональные свойства и доменную структуру поддерживающих белков - содержит несколько доменов взаимодействий белок-белок, в том числе три PDZ домена, один домен SH3 и один домен гомологии гуанилатциклазы киназы (ГУК), а также домен, связывающий F- актин. ZO-1 взаимодействует с клаудинами, с окклюдином, а также с актином и α-катенином. Кроме того, ZO-1 связывает до нескольких сигнальных белков, таких как серин/треониновая протеинкиназа, Y-бокс транскрипционный фактор ZONAB и белок теплового шока Apg2, а также Gα12, α -субъединицу гетеротримерных G-белков. ZO-1 экспрессируется в щелевой диафрагме почечных клубочков в норме и сконцентрирован в подоцитах вдоль цитоплазматической мембраны щелевой диафрагмы. Распределение ZO-1 и тесно развитые связи между двумя соединениями показывают, что щелевая мембрана представляет собой вариант плотного контакта, который разделяет с ним, по крайней мере, один структурный белок и функциональное свойство определения отличительных доменов плазмалеммы. Клубочковый эпителий является уникальным типом почечного эпителия, в котором присутствует ZO-1, но межклеточные пространства широко открыты и нет видимых фибрилл.
Две изоформы ZO-1 получаются путем альтернативного сплайсинга РНК и отличаются внутренним доменом длиной 80 аминокислотных остатков, так называемым альфа-доменом. Альфа-изоформа ZO-1 (-) экспрессируется в структурно динамических соединениях, ограничивается соединениями эндотелиальных клеток и узкоспециализированных эпителиальных клеток канальцев (клетки Сертоли) и почечных клубочков (подоциты). В отличие от этого, ZO-  альфа (+) изоформа экспрессируется в клетках всех других видов эпителия и экспрессируется в тех клетках, которые являются менее динамическими.
Разрушение плотных контактов и снижение белка ZO-1 может увеличить проницаемость подоцита. При нефротических условиях стирание ножек подоцитов приводит к потере щелевой диафрагмы и новообразованию плотных контактов, состоящих из белков рецептора вируса Коксаки и аденовируса (CAR) и ZO-1 (ZO-1). Экспрессия белков TJ клаудина-1, ZO-1 и окклюдина уменьшена при заболеваниях, связанных с образованием антител к базальной мембране клубочков (анти-GBM).
Вирусные геморрагические лихорадки характеризуются повышенной проницаемостью. Один из наиболее страдающих от геморрагической лихорадки с почечным синдромом, вызванной хантавирусами, органов-мишеней - почка, и эта инфекция часто приводит к острой почечной недостаточности. Эпителиальные и эндотелиальные клетки и подоциты чувствительны к хантавирусной инфекции, которая нарушает структуру и целостность контактов между клетками, как это показано для ZO-1, который в этих условиях перераспределяется, и его концентрация уменьшается. Кроме того, снижение клубочкового ZO-1 коррелирует с тяжестью заболевания, индуцированного клубочковой дисфункцией. Тот факт, что инфекция приводит к распаду межклеточных контактов, дает полезную информацию о патогенезе хантавирусной инфекции.
Диабетическая нефропатия связана с дедифференцировкой подоцитов, при этом теряются специализированные свойства, необходимые для эффективной функции клубочков, и приобретается ряд профибротических, провоспалительных и пролиферативных свойств. Это приводит к перестройке плотных контактов и цитоскелета. Дедифференцировка также связана со снижением экспрессии клубочковых эпителиальных маркеров (нефрина, P-кадгерина, ZO-1) и приводит к стиранию отростков ножек подоцитов, морфологическому сглаживанию и повышенному образованию межклеточных плотных контактов. Такое упрощение фенотипа подоцитов к более эмбриональной форме также связано с усиленной пролиферацией и апоптозом. Эти "патоадаптивные" изменения в клубочках, заметные на ранних стадиях диабетической нефропатии, в конечном счете способствуют альбуминурии, гломерулосклерозу и подоцитопении. Считается, что перераспределение ZO-1 является важным элементом изменений проницаемости, и сигнальные события, в которые вовлечен ZO-1, включают в себя перестройку трансактивации рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) через активацию ADAM17 и шеддинг EGFR. ADAM17 и EGFR могут быть потенциальными новыми терапевтическими целями при диабетической нефропатии и других хронических заболеваниях почек. У диабетических животных, подвергнутых воздействию высокого уровня глюкозы, в модельных исследованиях показано снижение экспрессии и перераспределение ZO-1 от мембраны подоцита в цитоплазму, Изменения эти ослабляются блокадой рецептора ангиотензина II типа 1. Эти данные позволяют предположить, что изменения в содержании и локализации ZO-1 могут иметь отношение к патогенезу протеинурии при диабете.
Плазма ожоговых пациентов с сепсисом содержит сепсис-ассоциированные факторы, которые влияют на функцию и выживание подоцитов. Эта плазма индуцировала снижение экспрессии белка плотных контактов ZO-1, что может быть связано с патогенезом острого тубулярного повреждения и протеинурией и является негативным прогностическим фактором у этих пациентов и показателем участия почек в системной воспалительной реакции.