Назначение: набор Human CCL20/MIP-3 alpha Quantikine ELISA Kit предназначен для количественного определения человеческого хемокина CCL20 (CCL20/MIP-3α) в образцах супернатантов клеточных культур, сыворотки и плазмы крови методом иммуноферментного анализа.
Диапазон измерения: 0.87-500 пг/мл.
Аналитическая чувствительность: 0.87 пг/мл.
Приложения теста: MIP-3α [макрофагальный белок воспаления-3α, также известный как LARC - печенью и активацией регулируемый хемокин, Exodus-1 или хемокин CCL20] является CC хемокином с селективной хемотаксической активностью для лимфоцитов и дендритных клеток (ДК). Он был независимо клонирован тремя отдельными группами в 1997 году из базы данных маркерных последовательностей нуклеотидов транскрибируемых участков ДНК (базы данных EST GenBank). MIP-3α играет важную роль в регуляции миграции ДК, а также рекрутинга и активации Т-клеток.
Полноразмерная кДНК для MIP-3α кодирует белок из 96 аминокислотных остатков (аа), который показывает относительно низкое сходство последовательностей с другими человеческими CC хемокинами. Он имеет высокую гомологию аа последовательности с MIP-1β (28% идентичности). Человеческий MIP-3α показывает 64% идентичности аа последовательности с мышиным ортологом. MIP-3α содержит четыре консервативных остатка цистеина, а также три из пяти других аа, которые высоко консервативны среди CC хемокинов. Остатки тирозина и треонина, которые обычно присутствуют между вторым и третьим остатками цистеина в других CC хемокинах, заменены в MIP-3α на остатки фенилаланина и аланина, соответственно. MIP-3α также отличается от других CC хемокинов тем, что его ген расположен на 2 хромосоме человека вместо 17-й хромосомы.
G-протеин-сопряженный хемокиновый рецептор CCR6 был идентифицирован в качестве функционального рецептора для MIP-3α. Активация CCR6 приводит к чувствительной к токсину коклюша и фосфолипаза С-зависимой внутриклеточной мобилизации Ca2+. Этот рецептор экспрессируется на T-клетках памяти, В-клетках и ДК. Цитокины могут влиять на экспрессию CCR6. TGF-β1, например, может усиливать экспрессию CCR6 на ДК, тогда как TNF-α и IL-4 могут снижать уровень CCR6. Экспрессия CCR6 на поверхности клетки определяет реактивность к MIP-3α. Восприимчивость В-клеток к MIP-3α и экспрессия CCR6 приобретаются только после миграции из костного мозга в периферические органы и во время созревания.
MIP-3α продуцируется активированными клетками, включая моноциты, Т-клетки, эндотелиальные клетки, эпителиальные клетки и фибробласты, и экспрессируется в печени, легких и в некоторых типах лимфоидной ткани. Экспрессия мРНК MIP-3α преобладает в воспаленной ткани и слизистых оболочках. Экспрессия MIP-3α может быть индуцирована цитокинами, такими как TNF-α, IL-1β, CD40-лиганд, IFN-γ и IL-17. Форболмиристат ацетат может также индуцировать экспрессию MIP-3α в нескольких клеточных линиях человека.
MIP-3α может участвовать в патогенезе некоторых заболеваний с помощью аутокринных и/или паракринных механизмов. Экспрессия MIP-3α и CCR6 на поверхности клеток заметно повышена при псориазе, что служит сильным доводом в пользу предположения, что взаимодействие между MIP-3α и его рецептором важно для рекрутинга T-клеток в поврежденные псориатические участки кожи. Клеточные линии рака поджелудочной железы гиперэкспрессируют MIP-3α по сравнению с нормальными клетками поджелудочной железы. Клетки папиллярной карциномы щитовидной железы секретируют HGF, который, в свою очередь, индуцирует экспрессию MIP-3α. Затем в ответ на MIP-3α рекрутируются ДК, которые инфильтрируют опухоль.
Как и MIP-3α, дефензины также служат хемоаттрактантами для незрелых ДК и Т-клеток памяти. Они могут способствовать иммунной защите организма-хозяина, разрушая цитоплазматическую мембрану микроорганизмов. Бета-дефензин может конкурентно вытеснять связывание MIP-3α с CCR6, тем самым способствуя адаптивному иммунному ответу через рекрутинг ДК и Т-клеток в места микробной инвазии.